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裸鼠成瘤實驗是從體外細胞試驗到動物水平體內(nèi)試驗,是基因功能研究的重要飛躍。動物實驗,由于其更能模擬人類的生理和病理條件,在科研上,動物實驗獲得的結(jié)果,將有更強的說服力。腫瘤研究中,最常規(guī)的動物實驗就是裸鼠成瘤實驗。由于大部分腫瘤研究使用的是人類細胞,所以由于異種排斥的存在,我們需要免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體,通過對該小鼠的注射腫瘤細胞,使其成瘤,觀察流體的生長來判斷其生物學變化。
細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù),但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同,細胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細胞克隆形成率弱,傳代細胞系強;二倍體細胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱,腫瘤細胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關系,做克隆形成率測定時,接種細胞一定要分散成單細胞懸液,直接接種在碟皿中,持續(xù)一周,隨時檢查,到細胞形成克隆時終止培養(yǎng)。
蛋白質(zhì)組學(英語:proteomics,又譯作蛋白質(zhì)體學),是以蛋白質(zhì)組為研究對象,研究細胞、組織或生物體蛋白質(zhì)組成及其變化規(guī)律的科學。這個概念最早是在1994年,由Marc Wikins首先提出的新名詞。
肝纖維化動物模型四氯化碳法:180~200g Wistar或SD大鼠,皮下注射40%-50%CCl4,油溶液(0.3ml/100g),每周2次,第2周 始,隔日以20%-30%酒精lml灌胃(或作為飲料),飼以單純玉米面(混以0.5%膽固醇),共10周。
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質(zhì)標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)?!∮脽晒饪贵w示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術,因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測或定位抗體,但是在實際工作中熒光抗原技術很少應用,所以人們習慣稱為熒光抗體技術,或稱為免疫熒光技術。以熒光抗體方法較常用。用免疫熒光技術顯示和檢查細胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。
肝纖維化動物模型構(gòu)建時免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機理是Ⅲ型變態(tài)反應引起,白蛋白和血清的大分子物質(zhì),作為異種抗原進入大鼠體內(nèi)后,刺激其產(chǎn)生相應的抗體,當抗原再次進人機體后抗原抗體結(jié)合,形成抗原—抗體免疫復合物(IC),抗原的反復、長期刺激,過量的免疫復合物來不及被清除
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