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自由基(free radicals),是指帶不成對電子的原子、分子、離子或原子團。自由基的種類很多,如以氧(O)、碳(C)、氮(N)為中心的活性基團?;钚匝踝?reactive oxygen species, ROS)是生物體內一些氧化反應中形成的氧自由基,常見有超氧化陰離子(O2-),過氧化氫(H2O2),過氧化自由基(ROO-)和氫氧自由基(OH-)等形式。自由基外層具有非配對電子,其化學性質非常活潑,它既是電子供體,又是電子受體。
活性氧是細胞線粒體氧化呼吸中產生的自由基活性的物質,參與細胞多種生理和病理形成機制。檢測細胞ROS的含量,可以了解ROS在細胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化,分析藥物效應和相關機制。
活性氧檢測試劑盒是利用ROS熒光探針-DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光,可自由透過活細胞膜,進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內的活性氧水平。根據活細胞中紅色熒光的產生,可以判斷細胞ROS含量的多少和變化。本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
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